流式细胞术是一种通过检测激光照射细胞后产生的散射光和荧光，从而获取细胞各类信息的技术。专为此技术设计的专用设备即为流式细胞仪。该设备借助特异性抗体进行荧光标记，用于检测细胞内外标志物，并可根据细胞类型、活性状态及细胞周期等多项参数，对细胞群体进行定量分析。

流式细胞仪的工作原理

流式细胞仪主要由液流系统、光学系统与电子系统三大核心部分构成，各部分分别承担不同的功能作用。

液流系统：由供细胞与鞘液流通的管路及玻璃器件组成，对细胞的流动通量与流动速度需进行稳定控制。

光学系统：由激发细胞的光源、检测细胞荧光与散射光的检测器、透镜及滤光元件构成。各器件需具备较高的稳定性与灵敏度，以支持细胞分析。

电子系统：接收光学系统输出的电信号，进行数据处理并解析测量结果。

1. 基本原理

经荧光染料标记的细胞悬浮液注入细管后，细胞会按固定间隔沿管路有序流动。随后激光束照射流动的细胞，细胞内荧光物质发出的荧光及细胞产生的散射光，由光电检测器采集并检测。

靶细胞被荧光标记。

将细胞引入流路系统中，并以固定的间隔移动通过管路。

用激光束照射细胞。

通过光学系统检测光信号。

技术趋势：多色分析

为获取更丰富的细胞信息，需利用多种标记物对细胞进行染色。在精确分辨各类标记物组合的检测过程中，通过不同波长的激光器与检测器进行多色分析，可发挥关键作用。

传统荧光检测通常限于荧光强度较高的波长范围。随着检测与分析技术的发展，目前能够采集全光谱荧光信息，有助于提升多色分析的准确性。

荧光溢出与补偿

多色分析中因同时采用多种荧光染料，不同波长的荧光容易发生波段重叠，导致光线渗漏至非对应检测通道，从而引发信号干扰。用于校正该问题的技术即为补偿技术。实施补偿时，需预先评估各类目标荧光染料之间的荧光重叠状况，并从原始信号中去除干扰成分。补偿处理的准确度，与流式细胞仪内置检测器的灵敏度性能密切相关。

传统流式细胞术中的波长光谱

与传统多色分析相比，传统流式细胞术单次检测的项目数量较少，波长光谱之间的重叠也相对较少，测量操作相对简便。

多色分析中的波长光谱

由于单次检测的项目数量较多，检测光谱容易出现相互重叠，因此多色分析对检测手段的要求更高。

多色分析技术支持

当前流式细胞术中的多色分析，对高性能、多功能的探测器提出了更高要求。为获取较为精确的检测数据，需将检测波长范围延伸至近红外波段，这就要求探测器在近红外区域具备较高的灵敏度。

为满足此类应用需求，业界正持续提升适用于多色分析场景的探测器性能。例如，相比光阴极面采用碱性材料的传统光电倍增管，采用晶体材料制备光阴极面的光电倍增管模块，其性能持续优化，在灵敏度提升的同时也增强了近红外响应能力。现有光电倍增管产品可在单一器件中集成多个检测通道，并配套功能模块，性能与功能均较好地适配多色分析应用需求。

光电倍增管量子效率比较

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